Criomicroscopia

Criomicroscopia Eletrônica de Transmissão (Crio-ME ou Cryo-EM – Cryogenic Transmission Electron Microscopy) é largamente utilizada para a observação de uma variedade de sistemas, desde materiais moles até biomoléculas. A preparação da amostra é realizada com seu congelamento rápido, que preserva o estado nativo. A coleta de dados é realizada em diferentes equipamentos. Materiais moles, principalmente sistemas coloidais, podem ser observados diretamente como se estivessem em suspensão, em condições de baixa dose, com alto-contraste e danos mínimos à amostra. As biomoléculas podem ter suas informações estruturais obtidas em alta resolução, usando a análise de partículas isoladas, acompanhada de coletas de dados em equipamentos de última geração.

Criomicroscopia Eletrônica em biologia estrutural: 

A Crio-ME é uma técnica poderosa para investigar estrutura de biomoléculas. O método de imersão rápida para vitrificação de amostras preserva a estrutura nativa das partículas que, junto com o uso de microscópios e detectores de última geração, permite acessar informações de alta resolução em estruturas tridimensionais. O LNNano conta com quatro criomicroscópios eletrônicos de transmissão, dois deles totalmente equipados para participar de projetos de biologia estrutural, contando com detectores diretos de elétrons, filtro de energia e “phase-plate”, operando a 200kV e 300kV. Os laboratórios de preparo de amostras contam com sistemas automáticos de preparo e estão equipados para apoiar todas as atividades necessárias na preparação de amostras, incluindo uma sala NB-2.

Criomicroscopia Eletrônica de materiais macios: 

O uso de Crio-ME para materiais sensíveis e materiais moles permite entender sua estrutura, minimizando os efeitos de dano por radiação e artefatos causados pela secagem durante a preparação da amostra. Nas instalações do LNNano, os usuários contam com diferentes equipamentos para coleta de dados, operando em 80kV, 200kV e 300kV, e equipados com câmeras de baixa dose e detectores diretos de elétrons. Isso garante que cada projeto seja apoiado com uma configuração adequada para atingir seus objetivos. 

Microscopia Eletrônica de amostras contrastadas 

Além do uso da criomicroscopia, que permite a observação direta em amostras hidratadas, técnicas de contrastação podem ser utilizadas para análises em temperatura ambiente. Essas técnicas podem ser aplicadas em materiais macios, células, tecidos e macromoléculas biológicas. Esta análise permite a observação de características morfológicas, tais como tamanho, forma e razão de aspecto. No caso de macromoléculas, a contrastação negativa também permite a obtenção de informação estrutural tridimensional de baixa resolução.